O ônibus transportava trabalhadores do Maranhão que seguiam para Santa Catarina, onde atuariam na colheita de maçã. De acordo com a Polícia Rodoviária Federal, o acidente ocorreu por volta da 1h40, quando o veículo saiu da pista e tombou. Há suspeita de que um pneu tenha estourado, hipótese que será analisada pela perícia.
Equipes da Polícia Civil de São Paulo chegaram ao local por volta das 3h30 e encontraram o coletivo destruído, com vidros estilhaçados e partes da estrutura espalhadas pela pista e pelo acostamento. Passageiros foram arremessados para fora durante o capotamento, e vítimas foram localizadas em um barranco às margens da rodovia.
Ao todo, 33 pessoas foram socorridas por equipes do Samu, Corpo de Bombeiros e unidades de resgate da concessionária responsável pelo trecho. Algumas vítimas apresentavam estado grave, inclusive com amputações. O número de mortos, inicialmente divulgado como três, subiu para seis ainda nas primeiras horas da manhã, incluindo óbitos confirmados em sala de emergência.
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